Нейтрализующие антитела к коронавирусу SARS‑CoV‑2, спайковый (S) белок, IgG, количественно ( Тест анти-RBD)

Что за тест анти-RBD и что он показывает? 

В настоящее время известно, что оболочка каждого вируса SARS-CoV-2 состоит из 4 структурных  и неструктурных  (протеаза, репликаза) белков:

1. S белок (spike), или белок-шип;
2. N белок, или нуклеокапсидный белок:
3. М белок, или мембранный белок и
4. Е белок оболочки.

Именно S-белок (spike) придает вирусу узнаваемый вид «вируса с короной». Одним из свойств S белка, точнее его рецептор-связывающего домена (RBD) является способность объединять оболочку (мембрану)  вируса с клеткой человека, тем самым обеспечивая проникновение в клетку и дальнейшее заражение организма. 

В ответ на заражение организм начинает реагировать выработкой антител различных классов. Именно их обнаружение позволяет установить факт инфицирования даже у бессимптомных пациентов. IgG начинают выявляться в среднем на 3-й неделе заболевания,  перемещаясь по сосудистому руслу пациентов длительно время. При лабораторном тестировании возможно определение IgG к различным белкам вируса. Наличие антител класса IgG к нуклеокапсидному белку является показателем перенесенной инфекции.

Выявление IgG к рецептору связывающего домена (RDB) – позволяет судить о наличии защитного иммунитета, который мог сформироваться после перенесенного заболевания, так и после вакцинации. Антитела к рецептору связывающего домена S белка обладают нейтрализующими свойствами и препятствуют связыванию вируса с клетками человека, тем самым обеспечивая важную роль в определении индивидуального протективного (защитного) иммунного ответа к SARS-CoV-2.

Что такое рецептор-связывающий домен (RBD) ?

RBD - рецептор-связывающий домен, отвечающий за соединение коронавируса с клеткой человека, а точнее, с рецептором ACE2, который находится на мембране клеток человека, через который вирус проникает в клетку, где в дальнейшем размножается, вызывает заболевание и, выделяясь в окружающую среду, вызывает появление все новых и новых случаев новой коронавирусной инфекции COVID-19.

Кому показан и когда нужно сдавать тест на наличие антител к S-белку?

В первую очередь анализ на определение нейтрализующих антител класса  g ( АНТИ RBD) показан лицам переболевшим новой коронавирусной инфекцией и лицам, после вакцинации препаратом "Спутник V" (Центр Гамалеи), а также другими  вакцинами, разрешенными к применению на территории РФ.  Рекомендуемый срок сдачи анализа на антитела после вакцины "Спутник V" 35-42 дня с момента постановки первого компонента. Для выявления антител после вакцины ЭпиваКкорона необходимы специальные тест системы "Вектор".

Чувствительность теста  в диапазоне  80-99 %, специфичность 95-99%

Какие факторы влияют на уровень выработки антител ?

•  Иммунный ответ выше у пациентов старше 40 лет.
• Лица старшего (60–85 лет) и среднего возраста (40–59 лет) имели значительно более высокие титры нейтрализующих SARS-CoV-2 антител, чем у более молодых пациентов (15–39 лет). 
•  Уровень антител выше у госпитализированных больных. Имеется корреляция со степенью тяжести заболевания. 
• Уровни антител ниже у женщин. 
• Нейтрализующая способность антител выше у мужчин. 
• Уровни антител ниже у курильщиков. ( Курение не защищает от ковид-19 вопреки популярному мнению)
• Уровни антител ниже у лиц, получающих противовоспалительные препараты.
• Чем больше масса тела, тем выше будут титры антител.

Расшифровка результатов исследования

Наша лаборатория указывает референсные значения в пределах 50 АЕ\мл. Если показатели выше 50 АЕ\мл- антитела обнаружены, если ниже-тест отрицательный.
с 09.07.2021 данное исследование будет будет предоставляться в условных единицах ВОЗ-BAU (единицы связывающих антител) на мл - BAU/ml.

• Меньше 1 BAU – контакта с коронавирусом не было 
• Меньше 10 BAU – исчезающе-малое количество антител, рекомендована ревакцинация.
• 10-100 BAU – средняя и слабая степень защиты организма
• 100-500 BAU – выраженный  иммунитет к коронавирусу
• Больше 500 BAU – мощное количество антител, высокий уровень иммунной защиты ( Максимальный уровень защиты)

По заявлению руководителя "Национального  исследовательского центра эпидемиологии и микробиологии имени Гамалеи"  Александра Гинцбурга, для полноценной защиты от новой коронавирусной инфекции достаточно иметь титры нейтрализующих антител класса g от 300 BAU\ml и выше.   

Некоторые регионы планируют выдачу QR-кода при высоком уровне нейтрализующих антител даже у неофициально переболевших лиц ( Лица переболевшие дома  с отрицательным тестом ПЦР). Анализ нужно будет сдать в специальных аккредитованных лабораториях. 

Образец анализа на антитела к COVID-19 (ABBOT)

Ниже представлен обезличенный результат пациента нашего медицинского центра (Мужчина, 35 лет)  после вакцинации "Спутником - V".  Анализ сдан через месяц после получения второго компонента. Результат 2510,4 BAU\ml, что соответствует результату 17 678,8 АЕ/ml по технологии Abbot. По результату данного анализа можно констатировать, что у пациента сформировался сверхмаксимальный уровень антител к S-белку новой коронавирусной инфекции.

При каком уровне антител нужно прививаться от COVID-19?

Положительные антитела и опасность для окружающих

По последним данным наблюдений, пациентов с положительными антителами g нельзя приравнивать к лицам, у которых можно полностью исключить вероятность выделения вируса в окружающую среду. То есть, они в данном случае имеют инфекционный статус. Нейтрализующие антитела к вирусу ( АНТИ RBD) не могут полностью блокировать активное выделение вируса и свести к нулю опасность заражения окружающих через выделяемый секрет. 

Как долго сохраняются защитные антитела к S-белку? ( АНТИ RBD) ?

Антитела могут сохранятся и определятся в сыворотке в течении 5-7 месяцев после начала заболевания. Уровень антител зависит от нескольких факторов, перечисленных выше. (Вес, пол, влияние вредных факторов, степень тяжести перенесенного заболевания и тд.). Все чаще и чаще высказывается в научных кругах мнение, что в связи с появлением нового штамма "Дельта" ( Индийский штамм) необходим более высокий уровень антител, поэтому рекомендуем периодически сдавать анализ, с целью отслеживания динамики титров антител. В случае снижения титров до низких показателей, следует рассмотреть вопрос о ревакцинации. 

 По последним  исследованиям, (статья опубликована 12.10.2021 ) проведенного в Швеции и Италии, показали, что у большинства переболевших COVID-19 в первые полгода количество антител снижалось постепенно, после чего показатель ( в течении 8-9 месяцев) до 15 месяцев был стабильным. 

Авторы собрали 188 анализов крови у 136 пациентов, у которых заболевание сопровождалось характерными симптомами и протекало в различной форме, от легкой до тяжелой. В качестве контрольной выборки использовали плазму 108 человек с подтвержденным отрицательным ПЦР-тестом.

Ученые измеряли титры анти-S и анти-RBD антител в плазме. Первые специфически направлены на спайковый белок, или S-белок вируса целиком, а вторые — на рецептор-связывающий домен (RBD) S-белка, играющий ключевую роль в связывании вируса с клетками. Известно, что со временем в структуре S-белка и RBD-домена накапливаются мутации, которые снижают нейтрализующую способность антител. Задачей ученых было определить время, в течение которого антитела плазматических клеток сохраняют активность.

Результаты показали, что на пике иммунного ответа у выздоравливающих пациентов уровни анти-RBD иммуноглобулинов IgM и IgG были увеличены на 77 и 85 процентов соответственно, но затем в течение шести-пятнадцати месяцев упали до 4,5 и 11 процентов. Антитела IgM и IgG к S-белку показали значения чуть выше — соответственно 88 и 90 процентов в первые один-три месяца и вполовину меньше через 55-56 дней.

Титры специфических антител IgG к RBD и S-белку у 94 процентов пациентов достигли максимума через 15-28 дней после появления симптомов, потом, после прохождения пика ответа антител, они постепенно уменьшились примерно в четыре раза к концу шестого месяца, а затем оставались стабильными до 15 месяцев. Дольше сохранялся высокий уровень антител у тех, кто переболел COVID-19 в тяжелой форме.

Для сравнения ученые оценили уровень специфических IgG антител в плазме вакцинированных. Оказалось, что через 14-35 дней после введения первой дозы вакцины титры антител были аналогичны таковым у переболевших через шесть месяцев после заражения, а после второй соответствовали максимальному уровню естественного ответа у выздоравливающих пациентов.

Помимо основного штамма SARS-CoV-2, авторы проверили эффективность антител в отношении бета, гамма и дельта-вариантов (мутировавшие штаммы) в течение 15 месяцев после заражения и подтвердили, что нейтрализующая активность антител, хоть и в меньшей степени, сохраняется и для этих вариантов коронавируса.

Кроме того, ученые определяли уровень Т-клеточного ответа, пик которого был отмечен между третьим и шестым месяцами после заражения, за которым последовало значительное снижение через 12-15 месяцев. Однако интенсивность и продолжительность ответа при этом не зависели от тяжести заболевания.
Авторы исследования уточняют, что для оценки длительного иммунитета, сохраняющегося в В-клетках памяти, 15 месяцев, в течение которых проводили исследование, недостаточно, но очевидно, что у большинства перенесших COVID-19 пациентов циркулирующие В- и Т-клетки памяти и нейтрализующие антитела присутствуют в плазме крови до 15 месяцев после заражения.

Несколько слов про новый штамм "Омикрон" 

 На данный момент информация в отношении нового штамма анализируется, но считается что он более заразен и содержит до 32 мутаций в S-белке вируса( Один из структурных белков). В связи с этим вводятся особые меры в отношении транспортного сообщения со странами, где он уже обнаружен штамм и карантинные меры в отношении прибывших.
 Информация пока по новому штамму анализируется. Известно, что он уже выявлен в 63 странах, зафиксирован один летальный исход в Лондоне и в целом вирус распространяется более стремительно, по сравнению с версией  "дельта". Омикрон может обходить защитные антитела и может заражать вакцинированных, но течение более мягкое и часть научного сообщества считает, что в случае занятия доминирующего положения, омикрон может в силу своей мягкости ( по информации на 14.12.2021г) завершить острую фазу пандемии COVID-19. Вирус может обнаруживаться при выполнении стандартного ПЦР теста, но уже в России появились тесты, выявляющие вирус с учетом его "штаммовой" принадлежности. 

Теперь можно получить COVID-сертификат при наличии антител класса G 

Министерство здравоохранения РФ опубликовало приказ №58н о внесении изменений в приложения №3 и №4  к приказу от 12.11.2021 №1053 н, согласно которому с 21.02.2022 можно будет получить COVID-сертификат по уровню имеющихся антител класса G. 
Приказ положение по необходимому уровню антител определяет следующим образом: сведения о положительных результатах на наличие антител класса G могут быть получены с помощью любого метода исследования. В основном анализ на антитела выполняется методами ИФА ( полуколичественный метод) и ИХЛА ( количественный метод, результат выдается в формате ВОЗ -BAU/ml).
Мы рекомендуем сдать анализ методом ИХЛА, так как он измеряется в международных (общепризнанных) единицах ВОЗ и срок выполнения 2-4 часа с момента доставки биоматериала в лабораторию.
Приказ не определяет минимально допустимый уровень, необходимый для получения сертификата. Достаточно получить по результатам анализа любое положительное значение.

• Срок действия сертификата при наличии антител класса G при наличии положительного ПЦР теста - 1 год, при отсутствии положительного ПЦР теста - 6 месяцев.

Где можно сдать анализ на нейтрализующие антитела к S белку?